肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)
產(chǎn)品簡介：
肌酐(creatinine,Cr)是人體或動物肌肉內(nèi)代謝的產(chǎn)物，每20g肌肉代謝可產(chǎn)生約1mg肌酐，由腎小球濾過排出體外，外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物，內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。
雅吉生物肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)檢測原理是肌酐與苦味酸鹽發(fā)生Jaffe反應(yīng)，生成橘紅色的苦味酸肌酐復合物，該復合物生成量與肌酐含量呈正比，通過酶標儀測定510nm處吸光度，可用于檢測人體、動物的血漿、血清、尿液樣品中肌酐含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成：
| 名稱 | 100T | Storage |
| 試劑(A):肌酐標準(10mmol/L) | 1ml | 4℃避光 |
| 試劑(B):肌酐標準稀釋液 | 10ml | RT |
| 試劑(C):蛋白沉淀液 | 5.5ml | RT避光 |
| 試劑(D):Cr顯色液 | 50ml | RT避光 |
| 試劑(E): Cr Assay Buffer | 5.5ml | RT |
自備材料：
1、1.5ml離心管、96孔板
2、離心機、酶標儀
3、蒸餾水
操作步驟(僅供參考)：
1、準備樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備，-20°℃凍存。取血清或血漿0.05ml，加入蛋白沉淀液0.45ml，充分混勻，靜置5min后3500r/min離心10min，取上清液，4°℃保存待用;尿液中肌酐含量較高，應(yīng)先用蒸餾水作50~200倍稀釋后再測。
2、配制標準品工作液:取肌酐標準(10mmol/L)，按肌酐標準(10mmol/L):肌酐標準稀釋液=1:99的比例混合，使?jié)舛冗_到100μmol/L，即為標準品工作液-肌酐標準(100μmol/L);4℃保存，1周有效。
3、Cr 加樣:按照下表設(shè)置空白孔、標準孔、測定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的Cr濃度過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。
| 加入物（μl） | 空白孔 | 標準孔 | 測定孔 |
| 蒸餾水 | 150 | - | - |
| 肌酐標準(100μmol/L) | - | 150 | - |
| 血清無蛋白濾液或稀釋尿液 | - | - | 150 |
| Cr顯色液 | 50 | 50 | 50 |
| Cr Assay Buffer | 50 | 50 | 50 |
4、Cr檢測:充分混勻，室溫放置15min，酶標儀檢測510nm吸光度，空白孔調(diào)零，讀取各孔吸光度，分別為A標準、A測定。
計算:
血清(漿)肌(μmol/L)=(A測定/A標準)×100
尿液肌酐(μmol/d)=(A測定/A標準)×100×N×24h 尿量(L)
式中:
A測定=測定孔的吸光度
A標準=標準孔的吸光度N=尿液稀釋倍數(shù)
內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)校正的內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=內(nèi)生肌醉清除率值×1.73/體表面積(m2)
注:以正常人24h內(nèi)生肌酐清除率值為128L(即24h內(nèi)有128L血液中的肌酐通過腎臟被清除)作為100%，則內(nèi)生肌酐清除率(%)=校正的內(nèi)生肌酊清除率值×100/128(或0.78)
單位換算:d=24h
參考區(qū)間：
| 健康成年男性血清肌酐 | 44~133μmol/L(O.5~1.5mg/dl) |
| 健康成年女性血清肌酐 | 70~106μmol/L(O.8~1.2mg/dl) |
| 健康成年男性肌酐清除率值 | 105±20ml/min |
| 健康成年女性肌酐清除率值 | 95±20ml/min |
注意事項:
1、測定各孔時，各孔溫度均需達到室溫，否則影響結(jié)果。
2、輕度溶血樣本對肌酐測定無影響;尿液樣品中肌酐含量較高，樣品需做50~200倍稀釋，如果顯色后吸光度仍較高，還需將尿液繼續(xù)擴大稀釋倍數(shù)，重新檢測。
3、呈色后標準管吸光度較穩(wěn)定，但測定管吸光度隨時間延長而增加;另外肌酐濃度越高，吸光度變化越快，因此加入顯色劑后30min內(nèi)完成檢測為宜。
4、以標準品做梯度實驗，200μmol/L以下濃度呈不同程度的黃色-橙黃色，超過200μmol/L顏色逐漸加深，呈橘紅色，到1000μmol/L呈深橘紅色;用酶標儀測定100μmol/L，吸光度值在0.3左右。
有效期:12個月有效。
