輔酶Q(CoenzymeQ,CoQ)是一種生物體內(nèi)廣泛存在的脂溶性醌類化合物,故又稱泛醌,在體內(nèi)呼吸鏈中質(zhì)子移位及電子傳遞中起重要作用,是呼吸鏈中重要的遞氫體,它是細(xì)胞呼吸和細(xì)胞代謝的激活劑,也是重要的抗氧化劑和非特異性免疫增強(qiáng)劑。對(duì)多種酶有激活作用。不同生物體來源的輔酶Q其側(cè)鏈異戊烯單位的數(shù)目不同,人類和哺乳動(dòng)物是10個(gè)異戊烯單位,故稱輔酶Q10。輔酶Q10是輔酶Q類的重要成員之一,它們與線粒體內(nèi)膜相結(jié)合,廣泛參與體內(nèi)的生物代謝過程。輔酶Q10不僅能給心臟提供動(dòng)力,還具有卓越的抗氧化,清除自由基功能,能預(yù)防血管壁脂質(zhì)過氧化,預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化,并且無任何毒副作用。具體作用體現(xiàn)在以下四個(gè)方面:
①幫助保護(hù)心臟輔酶Q10有助于為心肌提供充足氧氣,預(yù)防突發(fā)性心臟病,尤其在心肌缺氧過程中輔酶Q10發(fā)揮關(guān)鍵性改善作用。
②保護(hù)皮膚長期使用輔酶Q10能夠有效防止皮膚衰老,減少臉部皺紋。
③抗疲勞輔酶Q10使細(xì)胞保持良好健康的狀態(tài),因而機(jī)體充滿活力,精力旺盛,腦力充沛。它是細(xì)胞自身產(chǎn)生的天然抗氧化劑和細(xì)胞代謝啟動(dòng)劑,具有保護(hù)和恢復(fù)生物膜結(jié)構(gòu)的完整性、穩(wěn)定膜電位作用,是機(jī)體的非特異性免疫增強(qiáng)劑,因此顯示出極好抗疲勞作用。
④防癌抗癌研究表明,輔酶Q10有抗腫瘤作用,臨床對(duì)于晚期轉(zhuǎn)移性癌癥有一定療效。
雅吉生物輔酶Q10(CoQ10)檢測(cè)試劑盒(比色法)其檢測(cè)原理是待測(cè)樣品在堿性條件下,EC取代了CoQ10上的甲氰基,形成藍(lán)色化合物,通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定620nm處吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可測(cè)出輔酶Q10的含量。本產(chǎn)品可用于測(cè)定花生、牛肉、沙丁魚、保健品等食品中的CoQ10的含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
二、產(chǎn)品組成:
名稱規(guī)格 | 50T | 存儲(chǔ) |
試劑(A):CoQ10標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml) | 0.5ml | -20℃避光 |
試劑(B):EC solution | 25ml | RT避光 |
試劑(C):EC buffer | 100ml | RT |
試劑(D):CoQ10 Assay buffer | 25ml | RT |
使用說明書 | 一份 |
三、自備材料:
1、無水乙醇
2、比色杯或96孔板
3、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀
四、操作步驟(僅供參考):
1、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:用EC buffer稀釋CoQ10標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml)至0.5mg/ml,
-20℃保存?zhèn)溆谩?/font>
2、準(zhǔn)備樣品:取新鮮動(dòng)物心臟或肝臟等樣品,采用醇?jí)A皂化法、溶劑皂化法等提取適量的CoQ10提取液,-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
3、CoQ10加樣:按照下表設(shè)置空白、標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)定,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的CoQ10濃度過高,可適當(dāng)減少樣品用量或用EC buffer稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
普通分光光度計(jì)(2ml比色杯)CoQ10測(cè)定 | |||
加入物(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
EC buffer | 2 | 1.75 | 1.75 |
CoQ10標(biāo)準(zhǔn)(0.5mg/ml) | — | 0.25 | — |
待測(cè)樣品(提取液) | — | — | 0.25 |
EC solution | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
CoQ10 Assay buffer | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
酶標(biāo)儀CoQ10測(cè)定 | |||
加入物(μl) | 空白孔 | 標(biāo)準(zhǔn)孔 | 待測(cè)孔 |
EC buffer | 200 | 175 | 175 |
CoQ10標(biāo)準(zhǔn)(0.5mg/ml) | - | 25 | - |
待測(cè)樣品(提取液) | - | - | 25 |
EC solution | 50 | 50 | 50 |
CoQ10 Assay buffer | 50 | 50 | 50 |
4、CoQ10測(cè)定:混勻,室溫避光孵育3~5min,以空白管調(diào)零,比色杯光徑1cm,分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀600~640nm處測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)管或測(cè)定管的吸光度。
計(jì)算:
液體樣品輔酶Q10濃度:CoQ10(mg/ml)=A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn)×0.5
液體樣品輔酶Q10含量:CoQ10(mg)=A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn)×0.5×VT
每100g固體樣品輔酶Q10含量:CoQ10(mg/g)=A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn)×0.5×VT×100/m
式中:A測(cè)定=測(cè)定管的吸光度
A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度
0.5=CoQ10標(biāo)準(zhǔn)的濃度(mg/ml)
VT=CoQ10提取液的總體積(ml)
m=樣品的實(shí)際用量(g)
注意事項(xiàng):
1、待測(cè)樣品中不能含有CoQ10抑制劑,同時(shí)需避免反復(fù)凍融。
2、在皂化過程中,震蕩不要?jiǎng)×,以免形成乳化層?/span>
3、CoQ10 Assay buffer 如果出現(xiàn)渾濁或絮狀物,應(yīng)棄用。
4、CoQ10標(biāo)準(zhǔn)梯度應(yīng)準(zhǔn)確,盡量減少不必要的誤差。
5、EC solution有一定毒性,請(qǐng)小心操作。
6、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),按步驟3表格混合后,2min內(nèi)即出現(xiàn)明顯的藍(lán)色變化并逐漸加深,20min后藍(lán)色開始變淺,30min 后逐漸呈黃綠色。620nm檢測(cè)數(shù)據(jù)表明,隨著時(shí)間的延長,OD值在不斷的下降,對(duì)應(yīng)的顏色也已發(fā)生變化,特別是高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品變化比較大。因此,應(yīng)在出現(xiàn)最深的藍(lán)色結(jié)果且穩(wěn)定的時(shí)間段內(nèi)盡快檢測(cè),而且建議每次同時(shí)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品(0.3~0.5mg/ml)和樣品。如有條件,最好用酶標(biāo)儀檢測(cè),減少因檢測(cè)時(shí)間導(dǎo)致的誤差。
7、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6 個(gè)月有效。