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TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)

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一、產(chǎn)品簡介:

3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)是非常優(yōu)越的酶免試驗顯色劑,能溶解于多種有機(jī)溶劑和雙蒸水中,為穩(wěn)定的無色溶液,與適量過氧化脲或雙氧水與緩沖液混勻后與過氧化物酶作用產(chǎn)生清晰的藍(lán)色產(chǎn)物,極易觀察。由于其靈敏度高,配制后的工作液穩(wěn)定,加上無致癌特性,被廣泛用于酶聯(lián)免疫(ELISA)試驗和尿試紙的檢測反應(yīng)等,TMB主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA),經(jīng)典的方法是采用A、B液分開配制,使用前再混合的方法,并且長期存放穩(wěn)定,本試劑一般情況下為無色,有時略顯淺藍(lán)色或淺黃色。

雅吉生物的TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)主要由TMB顯色液、TMBbuffer、TMB氧化劑組成,其特點是:

1、靈敏度高;

2、穩(wěn)定性好,顯色終止后讀數(shù)穩(wěn)定;

3、背景低:底物溶液在450nm檢測時OD值一般小于0.05。

該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不用于臨床診斷或其他用途。 

二、產(chǎn)品組成:

名稱規(guī)格

2×50ml

存儲

試劑(A):TMB顯色液

50ml

4℃避光

試劑(B):TMB buffer

50ml

4℃避光

試劑(C):TMB氧化劑

100μl

4℃

使用說明書

一份

三、自備材料:

1、酶標(biāo)儀

2、酶標(biāo)板、96孔板

3、恒溫箱(備選)

4、(備選)終止液:鹽酸或硫酸等

四、操作步驟(僅供參考)

1、用適當(dāng)?shù)母蓛羧萜?/font>(用純凈水反復(fù)沖洗),取試劑(A)、(B)、(C),按ABC=500050004的比例混合,即為TMB顯色工作液,待達(dá)到室溫后即可使用。

2、加液:加完HRP結(jié)合物并溫育一定時間,洗板35次,每孔加TMB顯色工作液100μl,在室溫(1525℃)37℃下溫育1030分鐘。

3、(選做)終止:加等體積的1M鹽酸或硫酸溶液終止反應(yīng),孔中反應(yīng)液由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

4、讀數(shù):30min內(nèi)在450nm處讀數(shù)。

五、注意事項:

1、本試劑盒給予的TMB氧化劑多于實際使用量,請按比例使用。

2、TMB氧化劑易揮發(fā),請注意密閉保存,以免效率下降,一旦開封請盡快使用。

3、TMB氧化劑有腐蝕性,請勿直接接觸于人皮膚、毛發(fā)等。

4、如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀,表明TMB底物反應(yīng)過于強(qiáng)烈。

5、終止反應(yīng)不是必須步驟,如不加終止液應(yīng)顯色完成后立即檢測。

6、一般市售的濃鹽酸為11.6M,濃硫酸為18.3M,但應(yīng)注意其揮發(fā)性。

7、為了避免產(chǎn)生沉淀,可在終止后馬上讀數(shù),或者進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物,再次進(jìn)行試驗。

8、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

六、有效期:12個月內(nèi)有效。

七、運輸及保存:4℃運輸,4℃保存。

 

 

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