抗原修復(fù)緩沖液主要由H2O2-甲醇溶液、胰蛋白酶修復(fù)液組成。
組織在制作過程中,由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來,為了解決上述的問題,利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復(fù)。檸檬酸鹽、EDTA或Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林屏蔽的抗原重新暴露出來,同時(shí)又不會(huì)對抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準(zhǔn)確率。
在熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)法出現(xiàn)之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋 白酶等酶類的誘導(dǎo)的表位修復(fù)是常用的方法。Leagene 胰蛋白酶抗原修復(fù)試劑盒能暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理,抗原修復(fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí),可考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。按照每個(gè)片子需要10ml抗原修復(fù)液(1×)計(jì)算,100ml抗原修復(fù)液可以用于10個(gè)樣本的抗原修復(fù)。