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pRL-TK(報(bào)告基因質(zhì)粒)

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 pRL-TK(報(bào)告基因質(zhì)粒)是碧云天自行研發(fā)的用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行海腎螢光素酶(Renilla luciferase)報(bào)告基因檢測的質(zhì)粒,主要用于在其多克隆位點(diǎn)插入感興趣的5’-UTR、啟動(dòng)子、增強(qiáng)子等調(diào)控元件研究該調(diào)控序列的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性,或用作螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因檢測時(shí)的內(nèi)參,從而消除因?yàn)橘|(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率不同而帶來的誤差。

pRL-TK質(zhì)粒帶有的HSV TK promoter (單純皰疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶啟動(dòng)子)相對(duì)于SV40和CMV增強(qiáng)子/啟動(dòng)子較弱,更適用于共轉(zhuǎn)系統(tǒng)中的內(nèi)參報(bào)告基因。

pRL-TK質(zhì)粒攜帶renilla luciferase基因,編碼分子量為36kD的海腎螢光素酶,翻譯后無需修飾,常用于報(bào)告基因檢測。

本質(zhì)粒為氨芐抗性。

pRL-TK質(zhì)粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
HSV-TK promoter 7-759
Multiple cloning site 760-795
Chimeric intron 862-998
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2) 1042-1060
T7 RNA polymerase transcription initiation site 1059
Rluc reporter gene 1070-2005
SV40 late polyadenylation signal 2047-2248
β-lactamase (Ampr) coding region 2395-3255

pRL-TK質(zhì)粒的圖譜如下:

 

pRL-TK中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pRL-TK)包括:

AatII Acc65I AgeI AscI Asp718 BlpI BseRI BsgI
BsiWI BsmBI BspMII BstEII BstXI Bsu36I DraIII Eco47III
Eco72I EspI FseI KpnI NaeI NdeI NgoMI NruI
NsiI PaeR7I PflMI PmeI PmlI RsrII SacI SfiI
SnaBI SphI SplI

pRL-TK中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pRL-TK once)包括:

BglII A`GATC,T 2 Bsp120I G`GGCC,C 791
MscI TGG|CCA 129 ApaI G,GGCC`C 795
SapI GCTCTTC 8/11 138 BspMI ACCTGC 10/14 853
BssHII G`CGCG,C 242 NheI G`CTAG,C 1061
PspAI C`CCGG,G 283 XcmI CCANNNN,N`NNNNTGG 1720
XmaI C`CCGG,G 283 BsrGI T`GTAC,A 1769
SmaI CCC|GGG 285 XbaI T`CTAG,A 2008
KasI G`GCGC,C 290 NotI GC`GGCC,GC 2015
NarI GG`CG,CC 291 EagI C`GGCC,G 2015
EheI GGC|GCC 292 XmaIII C`GGCC,G 2015
BbeI G,GCGC`C 294 HpaI GTT|AAC 2158
SacII CC,GC`GG 300 MunI C`AATT,G 2167
PpuMI RG`GWC,CY 320 ClaI AT`CG,AT 2253
AvrII C`CTAG,G 323 BsaBI GATNN|NNATC 2259
NcoI C`CATG,G 331 BamHI G`GATC,C 2260
Bst1107I GTA|TAC 344 SspI AAT|ATT 2378
XcaI GTA|TAC 344 Bsp1286I G,DGCH`C 2600
PvuII CAG|CTG 532 PvuI CG,AT`CG 2814
MluI A`CGCG,T 714 EcoNI CCTNN`N,NNAGG 2822
HindIII A`AGCT,T 761 FspI TGC|GCA 2960
EcoRV GAT|ATC 775 Cfr10I R`CCGG,Y 3098
SalI G`TCGA,C 779 AhdI GACNN,N`NNGTC 3183
SpeI A`CTAG,T 785 HgiEII ACCNNNNNNGGT -1/13 3482

pRL-TK質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下:

T7 Primer(1042-1060): TAATACGACTCACTATAGG

pRL-TK的全序列信息:pRL-TK全序列.txt。

包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
D2760-1μg pRL-TK(報(bào)告基因質(zhì)粒) 1μg
D2760-100μg pRL-TK(報(bào)告基因質(zhì)粒) 100μg
說明書 1份

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-20℃保存。

注意事項(xiàng):

本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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