NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒(NF-κB Activation，Nuclear Translocation Assay Kit)是通過(guò)免疫熒光染色檢測(cè)NF-κB的主要亞基p65是否轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核內(nèi)從而確認(rèn)NF-κB是否被激活的檢測(cè)試劑盒。本試劑盒中的NF-κB p65(小鼠單抗)可以識(shí)別人、小鼠或大鼠的NF-κB p65亞基，因此本試劑盒可以檢測(cè)人、小鼠或大鼠細(xì)胞或組織中的NF-κB核轉(zhuǎn)運(yùn)激活。
本試劑盒提供了固定液、洗滌液、封閉液、一抗、熒光標(biāo)記二抗、細(xì)胞核熒光染色液、封片液，使用時(shí)不必再配制其它任何溶液。提供了細(xì)胞核熒光染色液，可以把細(xì)胞核染成藍(lán)色熒光，這樣可以清楚地判斷NF-κB是否被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核內(nèi)而被激活。使用本試劑盒檢測(cè)NRK-52E細(xì)胞中NF-κB核轉(zhuǎn)運(yùn)激活的效果參考圖1。
圖1. NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒(小鼠單抗)用于檢測(cè)NRK-52E(大鼠腎小管上皮細(xì)胞)細(xì)胞中NF-κB核轉(zhuǎn)運(yùn)激活的效果圖。正常情況下， p65分布在胞漿中(圖C, D)；在一定濃度的TNFα刺激下，NF-κB被激活，大多數(shù)p65轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核內(nèi)(圖G, H)。實(shí)際結(jié)果會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
碧云天兩個(gè)NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒的對(duì)比表格如下：
| 產(chǎn)品編號(hào) | SN368 | SN371 |
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒(兔多抗) | NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒(小鼠單抗) |
| 包裝 | >50次 | >50次 |
| p65抗體類(lèi)型 | 兔多抗 | 小鼠單抗 |
| 識(shí)別種屬 | 人、小鼠 | 人、小鼠、大鼠 |
| 熒光二抗 | 抗兔Cy3 (紅色熒光) | 抗小鼠Cy3 (紅色熒光) |
| 細(xì)胞核染料 | DAPI (藍(lán)色熒光) | DAPI (藍(lán)色熒光) |
| 特異性 | ★★★★★ | ★★★★★ |
| 檢測(cè)效果 | ★★★★★ | ★★★★★ |
NF-κB是一種常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子，可以被炎癥因子、生長(zhǎng)因子或趨化因子等激活。常見(jiàn)的炎癥因子(包括Interleukin-1和TNF-α等)都可以激活NF-κB。NF-κB由兩類(lèi)亞基形成同源或異源二聚體。一類(lèi)亞基包括p65(也稱(chēng)RelA)、RelB和C-Rel；另一類(lèi)亞基包括p50和p52。最常見(jiàn)的NF-κB亞基組成形式為p65/p50或p65/p65。
NF-κB未被激活時(shí)和IκB-α形成一個(gè)復(fù)合物，分布在細(xì)胞漿中。在炎癥因子、生長(zhǎng)因子或趨化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情況下，IκB-α會(huì)在Ser32和Ser36被磷酸化，隨后被泛素-蛋白酶體途徑降解。NF-κB和IκB-α解聚后，其核定位序列被暴露，從而被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核內(nèi)促進(jìn)NF-κB依賴(lài)的基因轉(zhuǎn)錄。通過(guò)免疫染色檢測(cè)NF-κB的主要亞基p65是否被轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，就可以判斷NF-κB是否被激活。
本NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒僅染色p65，不染色RelB、C-Rel、p50和p52。
使用本試劑盒染色后NF-κB呈紅色熒光，細(xì)胞核呈藍(lán)色熒光。
如果檢測(cè)組織切片或6孔板內(nèi)的細(xì)胞樣品，至少可以檢測(cè)50個(gè)樣品，如果檢測(cè)96孔板內(nèi)的樣品，至少可以檢測(cè)250-500個(gè)樣品。
包裝清單：
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 | |
| 固定液 | 50ml | |
| 洗滌液 | 250ml×2 | |
| 免疫熒光染色封閉液 | 50ml | |
| NF-κB p65小鼠單抗 | 6ml | |
| 抗小鼠Cy3 | 6ml | |
| 細(xì)胞核染色液(DAPI) | 50ml | |
| 抗熒光淬滅封片液 | 10ml | |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件：
固定液和細(xì)胞核染色液-20℃保存，其余試劑均4℃保存，半年有效。其中抗小鼠Cy3和細(xì)胞核染色液需避光保存。
注意事項(xiàng)：
固定液對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)?zhí)貏e小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
免疫熒光染色時(shí)，請(qǐng)注意回收使用過(guò)的NF-κB p65小鼠單抗和抗小鼠Cy3。回收后至少可以重復(fù)使用10次。
需使用可以觀察紅色熒光和藍(lán)色熒光的熒光顯微鏡。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
