尿酸鹽染色液(Gomori 六胺銀法)
人體內(nèi)嘌呤(核苷酸)代謝的分解產(chǎn)物是尿酸鹽。大多數(shù)尿酸并非全部經(jīng)由腎臟排除,有 時以尿酸鈉的形式存在于血液循環(huán)中。在痛風(fēng)患者血液中尿酸鈉含量較高,過高的尿酸鈉易出現(xiàn)尿酸鹽沉積,從而導(dǎo)致痛風(fēng)石、滑膜炎、關(guān)節(jié)炎、腎結(jié)石等。大多數(shù)尿酸鹽鏡下可見針 狀結(jié)晶體互相平行排列。
采用 Gomori 六胺銀法對尿酸鹽染色,使尿酸鹽結(jié)晶呈黑色,常用于輔助診斷尿酸鹽所致的通風(fēng)結(jié)節(jié)。由于尿酸鹽易溶于水,而不易溶于乙醇,故固定時,應(yīng)采用乙醇 而不是福爾馬林等固定液。
產(chǎn)品組成:
試劑(A): GomoriA1:Gomori 六胺銀 A
六胺銀溶液
4×50ml 25ml
25ml
4℃ 避 光
RT
臨用前,按 A1:A2 =1A:12的:G比om例o配ri 六制胺試劑銀(AB),不宜提前配制。
試劑(B): 氯化金溶液試劑(C): 海波溶液試劑(D): 伊紅染色液
試劑(E): Gomori 對照液
50ml 50ml 50ml
10ml
4℃ 避 光
RT
RT 避 光
RT
1 份
自備材料:
1、無水乙醇
2、蒸餾水
3、恒溫箱
操作步驟(僅供參考):
1、組織固定:固定于無水乙醇 16h 或過夜。再經(jīng)無水乙醇浸泡 3 次,每次 30min。
2、經(jīng)二甲苯浸泡 2 次,每次 20min,常規(guī)浸蠟包埋。
3、切片厚度 5μm,二甲苯脫蠟至無水乙醇。
4、提前配制好 Gomori 六胺銀溶液,并提前預(yù)熱至 58~60℃。切片浸入預(yù)熱的 Gomori
六胺銀溶液(加蓋),并置于 58~60℃恒溫箱孵育 30min。如有尿酸鹽存在,切片呈黑色。
5、蒸餾水稍洗。
6、浸入氯化金溶液處理 1min。
7、自來水稍洗。
8、入海波溶液處理 5min。
9、自來水沖洗 5min。
10、伊紅染色液淡染 30s。
11、自來水稍洗。
12、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
尿酸鹽結(jié)晶背景
黑色淡紅色
陰性對照:
取連續(xù)切片脫蠟后,先經(jīng) Gomori 對照孵育 5min,用無水乙醇侵洗 2 次,入 Gomori 六胺銀
溶液。其余步驟同前,鈣鹽呈陰性。
注意事項:
1、尿酸鹽易溶于水,組織固定必須用無水乙醇,切片入 Gomori 六胺銀溶液前避免切片與水接觸。
2、如果用水浴鍋代替恒溫箱,溫度應(yīng)適當(dāng)調(diào)節(jié)至 48~50℃,否則切片易變黑。
3、組織內(nèi)如果含有鈣鹽,易出現(xiàn)假陽性,應(yīng)注意與針狀的尿酸鹽區(qū)分。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 6 個月有效。