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小鼠附睪脂肪干細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述

 
根據(jù)不同來源及分化階段,干細(xì)胞可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞具有分化為多種不同組織的能力,但在倫理上存在爭議。成體干細(xì)胞因其來源廣泛、增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),現(xiàn)已成為組織工程學(xué)研究的首選種子細(xì)胞。其中,脂肪干細(xì)胞作為組織工程修復(fù)的種子細(xì)胞,因其具有來源豐富、取材容易、增殖能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),正受到越來越多的關(guān)注。
 
脂肪干細(xì)胞形態(tài)類似成纖維細(xì)胞,具有較強(qiáng)的增殖能力。在一定的誘導(dǎo)條件下,可分化為脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞等,具有多向分化潛能。
 
該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
 
注意事項(xiàng):  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。
 
細(xì)胞特性
 
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常脂肪組織。
 
2) 細(xì)胞鑒定:CD44免疫熒光染色為陽性,CD45免疫熒光染色為陰性。
 
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
 
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
 
5) 細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
 
產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存
 
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
 
1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
 
2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
 
推薦培養(yǎng)基
 
我們推薦使用原代干細(xì)胞培養(yǎng)體系(產(chǎn)品編號:012)作為體外培養(yǎng)C57小鼠附睪脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)基。
 

原代間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

4℃、避光

原代間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗(青霉素/鏈霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光


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