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小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述


角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不同,中央部最薄。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。

角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段,常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長(zhǎng)因子和藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。

該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項(xiàng):  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2) 細(xì)胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系(產(chǎn)品編號(hào):001)作為體外培養(yǎng)原代角膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)基。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

4℃、避光

原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

10ml

終濃度2%

-20℃、避光

雙抗(青霉素/鏈霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

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