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小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞永生化

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 細胞詳述


 骨髓間充質(zhì)干細胞是骨髓基質(zhì)干細胞,對骨髓中的造血干細胞(HSC)不僅有機械支持作用,還能分泌多種生長因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)來支持造血。骨髓間充質(zhì)干細胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潛能,能促進間充質(zhì)組織的再生,如:骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱、脂肪及基質(zhì)等組織。在骨髓中,BMSCs占骨髓有核細胞總數(shù)的0.001%~0.1%,含量極低。而同時,由于組織工程需要大量的種子細胞,從嚙齒類動物骨髓分離BMSCs的技術(shù)上的難度限制了許多實驗的開展。體外分離培養(yǎng)純度高、活力強、生物特性均一的BMSCs對組織工程及細胞的體內(nèi)、體外實驗顯得至關(guān)重要。

該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項:  收到細胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來培養(yǎng)細胞。

細胞特性

1) 組織來源于實驗動物的正常骨髓血組織。

2) 細胞鑒定:CD44免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。

 產(chǎn)品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1) 1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用原代間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)體系(產(chǎn)品編號:012)作為體外培養(yǎng)原代骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)基。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代間充質(zhì)干細胞細胞基礎培養(yǎng)基

500ml

4℃、避光

原代間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗(青霉素/鏈霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

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