| 細(xì)胞周期（cell cycle）是指連續(xù)分裂細(xì)胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個(gè)過(guò)程。在這個(gè)過(guò)程中，細(xì)胞遺傳物質(zhì)復(fù)制并加倍，且在分裂結(jié)束時(shí)平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去。細(xì)胞周期又可以分為間期(interphase)和有絲分裂期(M phase)，細(xì)胞間期又常劃分為休眠期（G0）,DNA合成前期(G1)，DNA合成期(S)，DNA合成后期(G2)，整個(gè)周期可表示為G1→S→G2→M。DNA周期檢測(cè)可用來(lái)反應(yīng)細(xì)胞周期的各個(gè)期的狀況，即細(xì)胞增殖狀況。利用細(xì)胞內(nèi)DNA能夠和熒光染料(如碘化丙啶--PI)結(jié)合的特性，細(xì)胞各個(gè)時(shí)期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細(xì)胞儀檢測(cè)的熒光強(qiáng)度也不一樣(如下圖所示)。PI-DNA復(fù)合物的最大激發(fā)波長(zhǎng)為535 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為615 nm，PI的紅色熒光在 FL2或 FL3 通道檢測(cè)。每個(gè)樣采集 20000～30000events。本試劑盒經(jīng)過(guò)優(yōu)化的配方，可獲得絕佳的周期結(jié)果，可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞（懸浮、貼壁）的 DNA含量（細(xì)胞周期）檢測(cè)。 | ||||||||
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組分 | ||||||||
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應(yīng)用 | ||||||||
| 細(xì)胞周期檢測(cè) | ||||||||
儲(chǔ)存 | ||||||||
| 2～8℃，有效期1年。 | ||||||||
注意事項(xiàng) | ||||||||
| 1. 乙醇固定后，細(xì)胞的吹打要輕柔，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞大量破碎。 2. 離心過(guò)程中盡可能采用吸取上清的方式，防止細(xì)胞大量丟失。 3. 無(wú)水乙醇要事先凍存于-20℃。 4. 試驗(yàn)操作過(guò)程中佩戴手套等防護(hù)用品。 | ||||||||
實(shí)例 | ||||||||
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| 圖：將融合度90%的A549細(xì)胞細(xì)胞分兩組，一組作為對(duì)照組正常培養(yǎng)，另一組向培養(yǎng)基中加入終濃度為5mM的喜樹(shù)堿處理24h后收集細(xì)胞，用細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒（）處理后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)，ModFit軟件分析，結(jié)果如圖。結(jié)果表明：實(shí)驗(yàn)組經(jīng)過(guò)喜樹(shù)堿處理后S期明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明喜樹(shù)堿處理后明顯抑制了A549細(xì)胞的增殖，數(shù)據(jù)CV值RCS值很小，試劑盒檢測(cè)效果良好。 | ||||||||
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