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EB替代物--6XSafe Dye Loading Buffer

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目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用的最普遍的核酸染料包括EB (溴化乙啶)、SYBR Green和GoldView,而這幾種染料在安全性、穩(wěn)定性和靈敏性方面都存在著不可忽視的缺點(diǎn)。其中EB是目前使用最廣泛的核酸染料,其靈敏度相對(duì)較高,但它是一種劇毒且具有高誘變性的化學(xué)物質(zhì),極大的危及實(shí)驗(yàn)人員的身體健康;而SYBR Green穩(wěn)定性差,在微堿性的電泳緩沖液中極易降解;市面上的GoldView則靈敏度較差,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性。為解決上述問(wèn)題,海基研發(fā)的全新一代EB替代染料-Safe Dye,安全、靈敏度高、穩(wěn)定性好,使用Safe Dye EB替代染料配制而成的Loading Buffer和DNA Marker具有安全、靈敏度高、穩(wěn)定性好、使用方便等優(yōu)點(diǎn)。
使用Safe Dye EB替代染料時(shí),在制膠過(guò)程中無(wú)需加入EB 、SYBR Green和GoldView等核酸染料,只需將DNA(PCR產(chǎn)物、質(zhì);蚧蚪MDNA)與Loading Buffer充分混合即可進(jìn)行凝膠電泳。由于Safe Dye EB替代染料的激發(fā)波長(zhǎng)與EB激發(fā)光波長(zhǎng)相同,故無(wú)需更換實(shí)驗(yàn)設(shè)備。;瞥龅腟afe Dye真正實(shí)現(xiàn)了安全、靈敏度高、穩(wěn)定性好的保證,成為真正的EB替代染料,是廣大實(shí)驗(yàn)室工作人員的最佳選擇。

主要特征

  • 安全保證:是EB、SYBR Green、GoldView染料新型的代替物,經(jīng)細(xì)胞學(xué)試驗(yàn)證明Safe Dye EB替代物不能穿透細(xì)胞膜,具有極低的細(xì)胞毒性和誘變性。
  • 高靈敏度:等于或稍高于EB,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于GoldView和SYBR Green。
  • 使用方便:無(wú)需加入凝膠中,只需將DNA(PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒或基因組DNA)或RNA與Loading Buffer充分混合即可進(jìn)行凝膠電泳,電泳后可直接進(jìn)行觀察。
  • 簡(jiǎn)化制膠過(guò)程:1min即可制備瓊脂糖凝膠。
  • 由于該染料無(wú)需添加入凝膠中,使制備的凝膠可保存更長(zhǎng)時(shí)間,從而節(jié)省凝膠的用量。
  • 激發(fā)波長(zhǎng)為300nm(或310nm),與EB激發(fā)光波長(zhǎng)相同,無(wú)需更換實(shí)驗(yàn)室設(shè)備
  • 穩(wěn)定性高于EB、SYBR Green、GoldView,可長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

儲(chǔ)存

室溫避光長(zhǎng)期保存,可保存兩年。

使用方法比較

染料種類 Safe Dye EB(溴化乙啶) SYBR Green/GoldView
(極低毒/高靈敏度) (劇毒/高靈敏度) (低毒/低靈敏度)
微波爐熔膠 1min 1min 1min
等待凝膠溫度降至65℃ 0min ~10min ~10min
倒入制膠槽中制膠
總共費(fèi)時(shí) 1min ~11min ~11min

細(xì)胞毒性比較

 
EB替代物-safe dye loading buffer Fig.分別使用1X SYBR Green I和Safe Dye對(duì)細(xì)胞進(jìn)行37℃孵育,并分別在5分鐘和25分鐘時(shí)段進(jìn)行觀察。結(jié)果表明SYBR Green I染料迅速進(jìn)入細(xì)胞并將細(xì)胞內(nèi)的核酸染成亮綠色,而Safe Dye則因?yàn)椴荒艽┩讣?xì)胞膜而不能進(jìn)入細(xì)胞, 證明Safe Dye是安全的。
 
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