cDNA第一鏈反轉(zhuǎn)錄試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系5×Golden RT MasterMix進(jìn)行RNA的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),使用時(shí)只需加入模板、引物和RNase Free H2O 即可,大大簡(jiǎn)化了操作過(guò)程、提高了效率、減少了操作過(guò)程中的人為誤差。MasterMix中添加了HL dsDNase(熱敏雙鏈特異性核酸酶),該雙鏈特異性核酸酶(又名gDNA Remover)可在反轉(zhuǎn)錄的過(guò)程中,直接降解去除RNA中殘留的基因組DNA污染(可去除100ng基因組DNA),從而在定量PCR的檢測(cè)中無(wú)需考慮基因組污染的干擾,設(shè)計(jì)的定量PCR引物也無(wú)需進(jìn)行橫跨外顯子。該試劑盒尤其適用于定量PCR檢測(cè)。 該預(yù)混體系包含點(diǎn)突變致RNase H活性缺失的Golden MLV Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、反應(yīng)Buffer、gDNA去除試劑和RNase Inhibitor。該試劑盒采用的反轉(zhuǎn)錄酶去除了RNase H活性,從而避免反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中降解RNA。同時(shí)經(jīng)過(guò)突變文庫(kù)篩選,使得其熱穩(wěn)定性更強(qiáng),可耐受55℃高溫反應(yīng)。相比于低溫條件下反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),采用高溫反轉(zhuǎn)錄可顯著打開(kāi)RNA二級(jí)結(jié)構(gòu),從而提高復(fù)雜RNA模板的擴(kuò)增性能、提高反轉(zhuǎn)錄cDNA的長(zhǎng)度和產(chǎn)量,從而提高后續(xù)檢測(cè)的靈敏度。合成的第一鏈cDNA可廣泛用于2nd Strand的合成、雜交、PCR擴(kuò)增、Real-Time PCR反應(yīng)等。 | ||||||||||
組分 | ||||||||||
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注:1.該制品可有效反轉(zhuǎn)錄mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA。 2. 該制品不可反轉(zhuǎn)錄microRNA、病毒DNA/RNA樣品。 | ||||||||||
主要特征 | ||||||||||
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儲(chǔ)存 | ||||||||||
請(qǐng)置于-20°C,可保存2年;避免反復(fù)凍融。注:如5×Golden RT MasterMix(with dsDNase)出現(xiàn)沉淀屬正,F(xiàn)象,可用手捂化,混合均勻后使用不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 |
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