儀器準(zhǔn)備：1光學(xué)顯微鏡，2.染缸，3.移液器，4.秒表，5.冰盒，6.載玻片，7.吸頭，8.一次性手套，9.純水
使用方法：
注意：所有的工作液請使用前新鮮配制，配制后立即使用，一次使用完，不可放置。
樣本的染色處理：
一、血涂片及骨髓涂片
1、推片：
取全血或骨髓3ul左右置載玻片上，將推玻片保持與載玻片30°角，置于血滴正前方，稍微往后移與血滴接觸，血滴沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動(dòng)，至血滴鋪完血膜為止。不要太薄，以免細(xì)胞太少，也不要太厚，以免太重疊。
2、固定：
讓涂片在空氣中自然晾干，再放入本試劑盒中的固定液A中固定2-3分鐘，水洗30-60秒。
3、孵育：
水洗后還未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
4、復(fù)染：
孵育完后，取出水洗1分鐘，在玻片未完全干前進(jìn)行復(fù)染�？捎锰K木素復(fù)染1-2分鐘，或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘，兩者任選其一即可。
二、細(xì)胞涂片及細(xì)胞爬片
1、固定：
將細(xì)胞涂片或細(xì)胞爬片放入本試劑盒中的固定液A中固定2-3分鐘，水洗30-60秒。
2、孵育：
水洗后還未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
3、復(fù)染：
孵育完后，取出水洗1分鐘，在玻片未完全干前進(jìn)行復(fù)染�？捎锰K木素復(fù)染1-2分鐘，或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘，兩者任選其一即可。
三、冰凍切片
1、回溫：
將保存在-20℃冰箱中的冰凍切片放置到切片架上回溫5-10分鐘。可以放在37℃孵箱中進(jìn)行回溫，或者將切片架放置在一個(gè)小盒子中，將盒子置于37℃水浴鍋中進(jìn)行回溫。
2、水合：
將回溫好的切片，水中浸泡1-2分鐘。
3、固定：
讓切片在空氣中自然晾干，再放入本試劑盒中的固定液中固定2-3分鐘，水洗30-60秒。
4、孵育：
水洗后還未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
5、復(fù)染：
孵育完后，取出水洗1分鐘，在玻片未完全干前進(jìn)行復(fù)染�？捎锰K木素復(fù)染1-2分鐘，或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘，兩者任選其一即可。
四、石蠟切片
1、脫蠟：
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。再換用新鮮的二甲苯脫蠟5-10分鐘。
2、浸泡：
無水乙醇浸泡5分鐘。再分別用90%、70%乙醇各2分鐘。
3、水合：
蒸餾水中浸泡2分鐘。
4、孵育：
還未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
5、復(fù)染：
孵育完后，取出水洗1分鐘，在玻片未完全干前進(jìn)行復(fù)染�？捎锰K木素復(fù)染1-2分鐘，或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘，兩者任選其一即可。
結(jié)果分析：
陽性反應(yīng)為鮮紅色或深紅色顆粒，定位于胞漿中。
注意事項(xiàng)：
1.TRAP孵育液易失效，本法宜用皮膚穿刺血涂片，晾干后應(yīng)及時(shí)染色；
2.對冰凍切片染色時(shí)，應(yīng)減少切片在室溫暴露的時(shí)間。
3.樣本需新鮮，取材后應(yīng)立即處理，否則會(huì)影響酶的活性。
4.組織固定需在4℃冰箱進(jìn)行，時(shí)間不宜超過24h，否則酶活性會(huì)減弱或消失。
5.一般不建議用石蠟切片。如果需要用石蠟切片，組織在石蠟包埋時(shí)，溫度不宜高于56℃。應(yīng)使用熔點(diǎn)為52～54℃的石蠟進(jìn)行浸蠟，浸蠟時(shí)間要短，否則酶活性會(huì)減弱或消失。
6.石蠟切片不需要固定。
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