產品概述 product description
細胞裂解液采用優(yōu)質原料配制，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典常用的細胞組織快速裂解液。 本細胞裂解液裂解得到的蛋白樣品主要用于常規(guī)的Western、IP等下游實驗。 可以提供針對動物細胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。 針對細胞膜、核、胞質、線粒體、溶酶體、高爾基體、內質網(wǎng)、外泌體等細胞不同部位的蛋白提取試劑盒。 可以提供針對下游實驗不同應用的試劑盒，例如用于Western Blotting和雙向電泳等不同下游應用的試劑盒；含去垢劑成分和不含去污劑成分的蛋白提取試劑盒；專用于蛋白質譜檢測、Pull-down實驗的試劑盒等總計300多種蛋白提取試劑盒供選擇使用。還可以提供針對動物、植物等不同樣本的細胞核、線粒體、溶酶體、葉綠體、外泌體等不同細胞器的提取試劑盒。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
有效期
1年
檢測方法
WB、IP等
適用樣本
細胞
產品特點
1、 使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。
2、 提取過程簡單方便，將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
3、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
4、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
5、 總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。
6、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
2、 提取過程簡單方便，將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
3、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
4、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
5、 總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。
6、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
WB、IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機/勻漿器
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機/勻漿器
試劑準備
1.PBS緩沖液 （pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
離心管
吸頭
一次性手套
吸頭
一次性手套
使用注意事項
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
2.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
6.下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時間。
2.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
6.下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時間。
使用方法
A． 細胞裂解
1. 裂解液制備：
每1ml冷的細胞裂解液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個細胞，在4℃，1000g條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液，混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃，12000-14000g條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。
B． 組織裂解
1. 裂解液制備：
每1ml冷的細胞裂解液加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本用手術剪刀剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿液在4℃振蕩15-25分鐘。
4. 在4℃，12000-14000g條件下離心15分鐘。
5. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。
上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/div>
1. 裂解液制備：
每1ml冷的細胞裂解液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個細胞，在4℃，1000g條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液，混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃，12000-14000g條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。
B． 組織裂解
1. 裂解液制備：
每1ml冷的細胞裂解液加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本用手術剪刀剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿液在4℃振蕩15-25分鐘。
4. 在4℃，12000-14000g條件下離心15分鐘。
5. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。
上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/div>
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