產(chǎn)品概述 product description
脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜的主要成分，結(jié)構(gòu)很復(fù)雜、熱穩(wěn)定性極高（在250℃下干熱滅菌2h才完全滅活）。受LPS發(fā)現(xiàn)的歷史原因，如今LPS的概念幾乎等同于內(nèi)毒素（endotoxin）。LPS由多糖鏈和脂質(zhì)A組成，不同細(xì)菌間的多糖鏈?zhǔn)歉叨茸兓�，決定細(xì)菌的血清型；而脂質(zhì)A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級(jí)聯(lián)反應(yīng)和機(jī)體的毒性病理生理活動(dòng)，包括釋放內(nèi)毒素引起感染性休克從而導(dǎo)致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測(cè)LPS的存在來診斷腦膜炎。 由于LPS與機(jī)體免疫機(jī)能的密切關(guān)系，生命科學(xué)研究常常提取LPS進(jìn)行相關(guān)的研究，如闡明LPS的結(jié)構(gòu)，代謝，免疫學(xué)，生理學(xué)，毒性，生物合成途徑；誘導(dǎo)生長(zhǎng)促進(jìn)因子如白介素的合成與分泌；誘導(dǎo)疾病研究的動(dòng)物模型如炎癥反應(yīng)，急性肺損傷。 PS提取試劑盒采用簡(jiǎn)單步驟即可快速提取細(xì)菌脂多糖，提取產(chǎn)量高，省時(shí)，蛋白質(zhì)和核酸污染低。
保存溫度
2-8℃
注意事項(xiàng)
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！
有效期
一年
檢測(cè)方法
WB,IP等
適用樣本
細(xì)菌
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.適用性廣，能從所有革蘭氏陰性菌中提取LPS。
2.操作簡(jiǎn)單方便。
3.提取LPS下游應(yīng)用廣，包括直接用于免疫刺激
2.操作簡(jiǎn)單方便。
3.提取LPS下游應(yīng)用廣，包括直接用于免疫刺激
產(chǎn)品應(yīng)用
WB,IP等
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項(xiàng)
使用注意事項(xiàng)：
1.離心機(jī)轉(zhuǎn)速有相對(duì)離心力（RCF，×g）和每分鐘轉(zhuǎn)速（RPM）兩種表示方式，有些離心機(jī)設(shè)置有RPM和×g顯示切換，但部分離心機(jī)沒有自動(dòng)切換功能。需要用下面的公式進(jìn)行換算：
g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 為有效離心半徑，即從離心機(jī)軸心到離心收集管底部中心位置的長(zhǎng)度，單位為厘米) 例如: 轉(zhuǎn)速為3000rpm，有效離心半徑為10 cm，則相對(duì)離心力（RCF，×g）為=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。
2.可以用試劑盒或者苯酚硫酸法進(jìn)行脂多糖定量。
1.離心機(jī)轉(zhuǎn)速有相對(duì)離心力（RCF，×g）和每分鐘轉(zhuǎn)速（RPM）兩種表示方式，有些離心機(jī)設(shè)置有RPM和×g顯示切換，但部分離心機(jī)沒有自動(dòng)切換功能。需要用下面的公式進(jìn)行換算：
g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 為有效離心半徑，即從離心機(jī)軸心到離心收集管底部中心位置的長(zhǎng)度，單位為厘米) 例如: 轉(zhuǎn)速為3000rpm，有效離心半徑為10 cm，則相對(duì)離心力（RCF，×g）為=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。
2.可以用試劑盒或者苯酚硫酸法進(jìn)行脂多糖定量。
使用方法
1. 室溫8000×g離心3分鐘收獲細(xì)菌細(xì)胞
2. 加入500 μl試劑A重懸細(xì)菌，8000×g離心3分鐘，棄上清。
3. 收集沉淀，加入500 μl試劑A重懸沉淀，8000×g離心3分鐘，棄上清。
4. 收集沉淀，加入500 μl提取液B重懸沉淀。
5. 在150-300w超聲10秒間隔10秒，超聲5-15分鐘。
6. 在10000×g離心10分鐘取上清。
7. 在上清中加入500 μl提取液C，劇烈渦旋20秒充分混勻。
8. 在66-68℃水浴或氣浴孵育30分鐘。中間隔10分鐘用移液器輕輕吹打混勻。
9. 置4℃靜置過夜。
10. 在4℃，3000×g離心20分鐘。
11. 取最上層上清至另一干凈離心管，即得脂多糖樣品。
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