產(chǎn)品名稱 | 人Burkitt’s淋巴瘤細(xì)胞熒光素酶;RAJI/LUC | 英文名稱RAJI/LUC | |
生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液 |
培養(yǎng)體系 | RPMI1640+10%FBS | ||
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過(guò)渡培養(yǎng) |
產(chǎn)品信息
T25 細(xì)胞到貨處理
觀察:
1、收到細(xì)胞后,請(qǐng)及時(shí)核對(duì)培養(yǎng)瓶上標(biāo)注的細(xì)胞名稱是否與訂購(gòu)的細(xì)胞名稱一致以及培養(yǎng)
瓶是否有破損或漏液等異常情況。
處理:
1、75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2、顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40x,100x,200x 各一張)前 三天照片為重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。
3、不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀
態(tài)。
4、收到細(xì)胞后,及時(shí)查看說(shuō)明書(shū)是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細(xì)胞
的傳代方法操作。
懸。
1、將 T25 培養(yǎng)瓶中的懸液收集至離心管中 1000rpm 離心 5min,收集上清(后期對(duì)比培養(yǎng) 使用),加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸,按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè) T25),補(bǔ)充新的完全
培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(傳代時(shí)建議一瓶用原瓶里 面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng)。)
(注意:如收到密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)
凍存細(xì)胞到貨處理
1、收到細(xì)胞后,檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等
2、正常請(qǐng)進(jìn)行以下操作:將細(xì)胞取出轉(zhuǎn)移至液氮或-80 度冰箱保存,建議盡早復(fù)蘇。
3、復(fù)蘇第一管如有活性狀態(tài)問(wèn)題及時(shí)與我們聯(lián)系,會(huì)有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再?gòu)?fù)蘇第
二管。特別說(shuō)明:未與我方聯(lián)系擅自復(fù)蘇第二管出現(xiàn)問(wèn)題不予售后。
細(xì)胞復(fù)蘇
1、 從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁:
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3、棄上清,沉淀用 5ml 完全培養(yǎng)基重懸,接種 T25 培養(yǎng)瓶,于 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代
1、方法一:收集細(xì)胞懸液,至離心管中 1000rpm 離心 5min,棄上清,加 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸,按 1:2 的比例進(jìn)行分瓶傳代,補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2
細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2、方法二:可選用半換液方式,將 T25 瓶子豎起來(lái),輕輕拍打兩下,在培養(yǎng)箱靜置 10 分鐘,肉眼可見(jiàn)大部分細(xì)胞沉在底部,輕輕吸去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按 1:
2 比例分瓶,補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),將 T25 培養(yǎng)瓶中的懸液收集至離心管中 1000rpm
離心 5min;
2、棄上清,沉淀細(xì)胞加入 1ml/支的雅吉無(wú)血清凍存液,混勻后加入凍存管中。
(如:凍一支,加入 1ml 無(wú)血清凍存液即可)
3、將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放 24 小時(shí)以上。
本庫(kù)的細(xì)胞系(株)僅用于科研工作。
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