產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
熒光染料PKH67是一種可對(duì)外泌體進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以通過(guò)與外泌體膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記外泌體。PKH67熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透外泌體膜，有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的外泌體可用于體外和體內(nèi)研究，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。PKH67標(biāo)記外泌體的熒光非常均一，陽(yáng)性標(biāo)記率達(dá)98%以上，標(biāo)記外泌體形態(tài)良好。 PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，熒光波長(zhǎng)：λex=490 nm, λem=502 nm。 可以提供細(xì)胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、細(xì)胞代謝、氧化應(yīng)激、細(xì)胞膜流動(dòng)性、膜通透性轉(zhuǎn)換孔、細(xì)胞耗氧率、細(xì)胞內(nèi)pH、細(xì)胞粘附、細(xì)胞自噬等數(shù)百種檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品。
儀器準(zhǔn)備：
1.流式細(xì)胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦
2.離心機(jī)
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
試劑準(zhǔn)備：PBS緩沖液或者HBSS
耗材準(zhǔn)備：
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法：
1. 試劑配制：從冰箱中取出PKH67試劑，靜置幾分鐘至室溫，或者37℃水浴片刻后，離心盛放PKH67的管子，開(kāi)蓋前請(qǐng)務(wù)必離心幾分鐘讓試劑充分落入管底后才能開(kāi)蓋。
2. 根據(jù)需要檢測(cè)的樣品數(shù)，用稀釋液將探針10倍稀釋，再用合適的溶液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）25倍稀釋，配制成染色工作液。
3. 將制備好的待測(cè)外泌體樣本用20-100 μl染色工作液重懸。
4. 在室溫或37℃避光孵育5-30分鐘。
5. 將外泌體重新離心提取，用PBS洗滌一次。
6. 根據(jù)需要使用標(biāo)記好的外泌體。
注意事項(xiàng)
1.PKH67熒光探針在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
2.熒光染色劑為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋
