產(chǎn)品概述 product description
CM-DiI細胞膜染色試劑盒是利用 M系列熒光探針進行細胞膜特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的 DiI細胞膜染色探針為橙色熒光標(biāo)記的細胞膜探針，具有549 / 565nm的最大激發(fā)/發(fā)射波長。 M系列探針是對活細胞的細胞膜進行選擇性染色的一類熒光染料，該系列探針可以選擇性標(biāo)記細胞膜。當(dāng)親脂性的熒光探針CM-DiI進入細胞膜后，在整個細胞膜上擴散，最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液CM-DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱，當(dāng)與細胞膜結(jié)合后其熒光強度大大增強，被激發(fā)后可以發(fā)出橙色的熒光，具有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。 熒光探針CM-DiI通常不會明顯影響細胞的活力，因此被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑（long-term tracer）。除了最簡單的細胞膜熒光標(biāo)記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。M系列細胞膜探針具有多種顏色可以選擇，可根據(jù)情況對樣品進行多色標(biāo)記實驗。除了本試劑盒的橙色熒光探針，還可以提供紅色、綠色、深紅色等顏色的染色試劑盒。 可以提供細胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、細胞代謝、氧化應(yīng)激、細胞膜流動性、膜通透性轉(zhuǎn)換孔、細胞耗氧率、細胞內(nèi)pH、細胞粘附、細胞自噬等數(shù)百種檢測試劑盒產(chǎn)品。 可以為您提供各種顏色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核、溶酶體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、骨架、微管等細胞、細胞亞結(jié)構(gòu)熒光染色試劑盒產(chǎn)品，以及鈣離子、鈉離子、氬離子等各種熒光染色試劑盒產(chǎn)品。 可以提供動物、植物、微生物、酵母、水產(chǎn)、家禽、獸類、土壤等樣本的各種生化指標(biāo)檢測的數(shù)百種試劑盒產(chǎn)品。 以96孔板每孔200μl染色液計，本試劑盒小包裝可以染色1000-5000個樣本。
2.熒光染色劑為DMSO溶液，冬季氣溫較低時為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短時間水浴。吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
4.試劑拆封后請盡快使用完！
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.吸頭
3.一次性手套
2.CM-DiI染色液為DMSO溶液，冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
3.使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。
4.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
5.標(biāo)記的條件因細胞種類而異，根據(jù)不同樣本的實際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整，在每次實驗前，請先根據(jù)不同的實驗要求、細胞類型、細胞的膜通透性等進行優(yōu)化，確定最佳條件。以下方法僅供參考。
6.染色后立即進行分析。
7.本染色液可用于細胞涂片、細胞的檢測。
根據(jù)樣本數(shù)量，用37℃培養(yǎng)箱預(yù)熱的HBSS或相應(yīng)的無血清培養(yǎng)基或其他緩沖液將 CM-DiI熒光染料進行500-1000倍稀釋，配制成染色工作液。
2． 細胞染色
懸浮細胞染色
1) 用PBS洗滌細胞2次。
2) 加入適量體積的染色工作液重懸細胞，使其密度大約為1×106/mL。
3) 在37 ℃孵育細胞 5～20分鐘，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同�？梢杂�20分鐘作為起始孵育時間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記結(jié)果。
4) 孵育結(jié)束，500×g離心5分鐘。
5) 傾倒上清液，再次緩慢加入37℃預(yù)熱的培養(yǎng)基重懸細胞。
6) 重復(fù)（4），（5）步驟兩次以上
貼壁細胞染色
1) 用PBS洗滌細胞2次。
2) 細胞培養(yǎng)板中或細胞爬片上加入適量體積的染色工作液。
3) 37 ℃孵育細胞 5～20分鐘，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同�？梢杂�20分鐘作為起始孵育時間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記結(jié)果。
4) 吸干染色工作液，用培養(yǎng)液洗培養(yǎng)板或蓋玻片2～3次，每次用預(yù)熱的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞，孵育5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。
3． 用熒光顯微鏡/共聚焦或流式細胞儀檢測
激發(fā)波長為549nm，最大發(fā)射波長為565nm。
