產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是專為犬骨髓間充質(zhì)干細 胞研制優(yōu)化的成骨誘導分化培養(yǎng)基試劑 盒，用于增強犬骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞方 向誘導分化的能力。
在庫產(chǎn)品均通過生物安全檢 測和產(chǎn)品質(zhì)量檢測，體系穩(wěn)定有效，現(xiàn)貨發(fā)送， 性價比高。專業(yè)的研發(fā)團隊可提供最有 效的技術(shù)指導，保證售后品質(zhì)。
質(zhì)檢標準： pH：7.2~7.4
內(nèi)毒素含量：＜10 EU/mL
生物安全：細菌、真菌、支原體檢測陰性
質(zhì)量檢測：誘導測試合格
運輸方式：產(chǎn)品冰袋冷藏運輸
檢驗原理：茜素紅是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學樣本檢 驗的示鈣染劑，游離的鈣離子不能與茜素紅形成 紅色沉淀，而固化的鈣質(zhì)結(jié)節(jié)則能被染成紅色。 干細胞在誘導培養(yǎng)基作用下，會逐漸向骨細胞方 向分化，產(chǎn)生明顯的泌鈣反應(yīng)，形成鈣鹽結(jié)晶或 鈣質(zhì)結(jié)節(jié)，均能被茜素紅染色。
使用說明
1. 成骨誘導分化操作
1.1 明膠包被培養(yǎng)器皿 干細胞培養(yǎng)較長時間后，可能會出現(xiàn)脫壁卷 邊或漂浮現(xiàn)象，建議使用0.1%明膠溶液對培養(yǎng)器 皿進行包被。準備合適的培養(yǎng)器皿，取適量明膠 覆蓋底面，37°C靜置30 min，吸取晾干即可使用。
1.2 接種干細胞 取對數(shù)生長期的細胞， 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細胞密度接種至包被后的培養(yǎng)器皿中， 于 37℃，5% CO2 培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 60~70%，棄掉上清，加入成骨誘導分化培養(yǎng)基。
1.3 細胞分化誘導 于37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約14~21天， 每2~3天換液一次，并注意觀察細胞形態(tài)變化。 根據(jù)細胞鈣鹽結(jié)晶析出和鈣質(zhì)結(jié)節(jié)形成的情況， 決定終止細胞誘導的時間，并進行染色鑒定。
2. 染色鑒定
2.1 細胞固定 吸去培養(yǎng)基使用適量1×PBS清洗一次，棄去 后取適量4%中性甲醛溶液覆蓋培養(yǎng)器皿底面，室 溫固定30~60 min，棄去固定液再使用1×PBS清洗 兩次。
2.2 茜素紅染色 加入適量茜素紅染色液染3~5 min，吸走茜 素紅染色液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1× PBS避免細胞干燥。
2.3 誘導評估 顯微鏡下觀察成骨染色效果，并進行圖像采 集和誘導評估。誘導成功時，鈣質(zhì)結(jié)節(jié)與茜素紅 染料結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。
NOTE: 干細胞的成骨分化水平因細胞類型、細胞供體來 源，培養(yǎng)條件、細胞代次、細胞狀態(tài)和分化時間等因素而 異。
