1.請(qǐng)立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2.請(qǐng)立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進(jìn)行培養(yǎng)傳代
注意:如為凍存管，請(qǐng)收到后立即解凍培養(yǎng)。若來(lái)不及解凍，請(qǐng)儲(chǔ)存于液氮中(存儲(chǔ)于負(fù)80度，會(huì)降低細(xì)胞存活率)
培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟
對(duì)于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞，寄送前，我們會(huì)將培養(yǎng)基充滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中細(xì)胞所受震蕩。
1.收到細(xì)胞產(chǎn)品后，請(qǐng)注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。
2.將培養(yǎng)瓶豎直放置于37℃培養(yǎng)箱中直至溫度平衡，隨后，在生物安全柜中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管中，離心200xg/5-10 min，去除上清后，用5mt培養(yǎng)基吹散細(xì)胞。
3.對(duì)上述細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力檢測(cè)，調(diào)整細(xì)胞密度至2-3x10' cells/mL，并轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中。
4.將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5% CO,的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細(xì)胞達(dá)到傳代培養(yǎng)的密度，則進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
凍存細(xì)胞操作步驟
注意:為保存細(xì)胞的高存活率，請(qǐng)收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)，1.將凍存管置于37℃ 水浴中來(lái)回晃動(dòng)，迅速解凍。為避免污染確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。2.一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開(kāi)始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5ml完全培養(yǎng)基的離心管中，離心200xg/5-10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。4.用完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率，請(qǐng)將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。5.將細(xì)胞置于含有5%CO,的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
