注 意 :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
白蛋白由肝實質(zhì)細胞合成,在血漿蛋白中含量最多,具有重要的生理功能,包括維持膠體滲透壓,并可與長鏈脂肪酸、膽汁酸、膽紅素、血紅素、鈣和鎂離子等物質(zhì)結合。它擁有抗氧化性和抗凝血性,能充當營養(yǎng)物質(zhì)和藥物的運輸載體,同時也是血漿PH值的緩沖劑。血清白蛋白含量直接關系到肝臟疾病、腎臟疾病、營養(yǎng)不良或蛋白流失性腸道病癥的發(fā)生發(fā)展,是臨床檢測的一個重要指標。
測定原理:
白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷,可與帶負電荷的染料溴甲酚綠結合形成藍綠色復合物,在波長630nm處有吸收峰,在一定范圍內(nèi)其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。
劑組成和配制:
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
標準品:液體0.5mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理:
1. 血清:直接檢測。
2. 尿液:直接檢測。
測定操作表:
| 空白管 | 標準管 | 測定管 |
蒸餾水(μL) | 10 |
|
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標準品(μL) |
| 10 |
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樣本(μL) |
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| 10 |
試劑一(μL) | 1000 | 1000 | 1000 |
混勻,25℃靜置1min,于1mL玻璃比色皿,空白管調(diào)零,測定630nm處吸光值A。分別記為A標準管和A測定管 |
計算公式:
白蛋白濃度(mg/mL)= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管:5mg/mL
注意事項:
1. 靜置1min后盡快完成測定,以免引起非特異性呈色反應。
2. 線性范圍為2mg/mL-40mg/mL。