質(zhì)量檢測(cè):CD44免疫熒光染色為陽(yáng)性,CD45免疫熒光染色為陰性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
培養(yǎng)基:小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞完全培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰蛋白酶
產(chǎn)品貨期:5-6周左右
運(yùn)輸方式:T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹
小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一種多能干細(xì)胞,是具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下,它可以分化成多種功能細(xì)胞像APSC多能細(xì)胞。在胚胎發(fā)育中來(lái)源于中胚層。在機(jī)體正常的組織損傷修復(fù)過程中,MSC是一種重要的參與組織再生的細(xì)胞庫(kù)。在組織損傷引起的特殊信號(hào)作用下,MSC遷移到受損部位,在局部聚集增殖,依據(jù)不同的損傷信號(hào)沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴(kuò)增,體外倍增能力旺盛,能保持其多向分化能力。因此,MSC是一種實(shí)用的組織修復(fù)種子細(xì)胞。相較于其他干細(xì)胞,胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞具有來(lái)源方便,細(xì)胞數(shù)量充足,易于分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和純化,傳代擴(kuò)增多代后仍具有干細(xì)胞特性。胎盤是干細(xì)胞的最佳來(lái)源。
收貨處理:取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度:細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù):可傳2-3代,建議收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)
傳代比例:首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。
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