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外泌體定量檢測(cè)試劑盒

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本產(chǎn)品是基于ELISA夾心法檢測(cè)外泌體含量的試劑盒,利用高性能抗CD9捕獲和抗CD81檢測(cè)抗體。它可用于檢測(cè)人體體液或細(xì)胞培養(yǎng)上清液,靈敏和定量地檢測(cè)共表達(dá)外泌體表面標(biāo)記CD9和CD81的靶標(biāo),實(shí)現(xiàn)樣本中完整外泌體的快速精準(zhǔn)定量。
產(chǎn)品特點(diǎn):
應(yīng)用廣泛:適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液、血清等多種類型樣本;
操作簡(jiǎn)單:僅需1臺(tái)450 nm 酶標(biāo)儀,無(wú)需其它任何設(shè)備;
穩(wěn)定性、重現(xiàn)性高:為了實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定性和再現(xiàn)性,試劑盒使用了CD9/CD81融合蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,而非不穩(wěn)定、難以儲(chǔ)存的外泌體本身。
外泌體完整性檢測(cè):可用于外泌體完整性快速評(píng)估。
產(chǎn)品原理:
產(chǎn)品組分:
名稱 規(guī)格 儲(chǔ)存
捕獲抗體包被板 96T 2-8℃
Exosomes標(biāo)準(zhǔn)品(S1-S5) 1mL×5 -20℃
酶標(biāo)記物 10mL 2-8℃
顯色液A 6mL 2-8℃
顯色液B 6mL 2-8℃
終止液 6mL 2-8℃
濃縮洗液(20X) 30mL 2-8℃
稀釋液 5mL 2-8℃
使用方法
1、試劑配制
①所有試劑應(yīng)在使用前室溫平衡至少15 min。
②取濃縮洗液(20×),用蒸餾水或去離子水將20× 濃縮洗液稀釋成1× 工作液,混勻備用。(試劑盒提供稀釋液,可自行用高濃度標(biāo)準(zhǔn)品稀釋使用)

2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程
①準(zhǔn)備已平衡好的板條和試劑,試劑充分搖勻。
②微孔板中分別加入各濃度Exosomes標(biāo)準(zhǔn)品以及待測(cè)樣本(100uL/孔)。
③用封板膜封住反應(yīng)孔,于37°C恒溫條件下,避光孵育60min。
④孵育結(jié)束后,加入工作液洗液清洗3次,每次200-250uL/孔,洗板結(jié)束后在吸水紙上拍干。
⑤每孔加入100uL酶標(biāo)記物,用封板膜封住反應(yīng)孔,于37°C恒溫條件下,避光孵育60min。
⑥孵育結(jié)束后,加入工作液洗液清洗3次,每次200-250uL/孔,洗板結(jié)束后在吸水紙上拍干。
⑦配制顯色底物工作液:將顯色液A和B等比例混合得顯色底物工作液(請(qǐng)配置完2min內(nèi)使用)。
⑧各反應(yīng)孔加入100uL顯色底物液工作液,37°C恒溫條件下避光反應(yīng)30min。
⑨各反應(yīng)孔加入50uL終止液,均勻后即刻測(cè)量OD450值(3min內(nèi)),并繪制XY線性曲線。

3、校準(zhǔn)程序
XY 線性擬合,其線性相關(guān)系數(shù) R² ≥0.99,  每次實(shí)驗(yàn)都要做全套校準(zhǔn)品,繪制曲線。
校準(zhǔn)點(diǎn) S1 S2 S3 S4 S5
濃度(ng/mL) 0 7.816 15.625 31.25 45
OD450 0.0737 0.3074 0.5183 0.8618 1.2945


注:本圖僅供參考,應(yīng)以同次實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中Exosome的含量。
性能  
儲(chǔ)存/保存方法
2-8℃保存,Exosomes標(biāo)準(zhǔn)品 -20°C保存,避光,有效期12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1、本試劑盒需避光保存。
2、本品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。
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